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如何選擇ELISA試劑盒？
2023-10-17
酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)技術(shù)從1970年代發(fā)展至今已近半個(gè)世紀(jì)，是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室最基本的免疫檢測(cè)技術(shù)，被廣泛的應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。那么面對(duì)市面上數(shù)以千計(jì)的試劑盒，數(shù)百家供應(yīng)商，該如何選擇適合的ELISA試劑盒呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、明確研究種屬一般來(lái)說(shuō)，廠(chǎng)家都會(huì)在產(chǎn)品名稱(chēng)上標(biāo)明種屬，且為shou個(gè)單詞，檢索種屬的常用語(yǔ)言為英文。如果您需對(duì)不同物種的同一因子進(jìn)行定量，建議優(yōu)先尋找適用于多個(gè)種屬的ELIS...
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ELISA樣本處理的注意事項(xiàng)有什么？
2023-10-17
ELISA的檢測(cè)目的是為了實(shí)驗(yàn)提供準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須堅(jiān)持全面的質(zhì)量控制和全過(guò)程質(zhì)量控制，在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃。那么你知道ELISA樣本處理的注意事項(xiàng)有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、每個(gè)樣本量收集體積=100ulx檢測(cè)種類(lèi)，如果要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積=100ulx檢測(cè)種類(lèi)x2。二、樣本收集后若在一周內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)可保存于2-8°C，若不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)進(jìn)行分裝，凍存于-20°或-80°C，避免反復(fù)凍融。三、試劑盒的檢測(cè)范圍不等同...
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蛋白檢測(cè)條帶的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？如何解決？
2023-10-16
你知道在蛋白檢測(cè)中條帶的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？該如何解決嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、條帶出現(xiàn)位置比預(yù)期低或高①當(dāng)條帶出現(xiàn)位置比預(yù)期低：原因：目的蛋白經(jīng)過(guò)剪切或降解，有相同或相似抗原表位的蛋白被抗體檢測(cè)出解決辦法：樣品準(zhǔn)備時(shí)候要在冰上操作；加入更過(guò)蛋白酶抑制劑；更換別的抗體②當(dāng)條帶出現(xiàn)位置比預(yù)期略高：原因1：蛋白可能被糖基化，或氨基酸基被修飾解決辦法：使用酶去除可能的蛋白修飾；檢查抗原序列原因2：可能有融合蛋白解決辦法：查看表達(dá)序列原因3：蛋白形成二聚體或多聚體解決辦法：加強(qiáng)變性條件...
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引物的純化方法有哪些？
2023-10-16
你知道引物的純化方法有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、脫鹽寡核苷酸合成后，為了純化寡核苷酸成為天然的DNA結(jié)構(gòu)，首先必須去除保護(hù)基團(tuán)。通過(guò)濃氨水處理，合成的寡核苷酸從固相載體上分離，2-氰乙氧基--磷酸二脂鍵的保護(hù)基團(tuán)，以及堿基的保護(hù)基團(tuán)基（苯甲?；彤惗』┍蝗コ?，從而形成了天然的DNA結(jié)構(gòu)。然而，必要的去保護(hù)步驟完成后，寡核苷酸混合物還包含幾種必須被去除的小分子有機(jī)化合物。所有非必須有機(jī)化合物被移除的過(guò)程通常叫做脫鹽。脫鹽純化可以借助反向硅膠柱進(jìn)行。盡管脫鹽純化可以移除所...
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培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)有什么？
2023-10-13
培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長(zhǎng)和繁殖所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，因此對(duì)于微生物檢驗(yàn)而言，培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。那么培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)有什么呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、配制要求正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗(yàn)的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時(shí)，要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行配制，并做好配制記錄。在配制過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)人員需要嚴(yán)格遵守相關(guān)操作標(biāo)準(zhǔn)，佩戴口罩進(jìn)行操作，避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末，稱(chēng)量、溶解應(yīng)使用專(zhuān)門(mén)...
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PCR反應(yīng)污染的處理方法有哪些？
2023-10-13
PCR反應(yīng)的特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與靈敏性，但令人頭痛的問(wèn)題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽(yáng)性的產(chǎn)生。那么你知道PCR反應(yīng)污染的處理方法有哪些嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、環(huán)境污染1.稀酸處理法：對(duì)可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡，使殘余DNA脫嘌呤。2.紫外照射（UV）法：紫外波長(zhǎng)（nm）一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是，選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時(shí)，要考慮PCR產(chǎn)物的長(zhǎng)度與產(chǎn)物序列中堿基的分布，UV照射僅對(duì)500bp以上長(zhǎng)片段有效...
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離心柱法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有哪些？
2023-10-12
離心柱上有硅膠濾膜，在高鹽低pH條件下，核酸能結(jié)合到硅膠膜上，而蛋白質(zhì)和其他代謝產(chǎn)物被洗脫；后續(xù)改變反應(yīng)條件到低鹽高pH來(lái)洗脫純化DNA。用離心柱法來(lái)提取DNA，得到的DNA質(zhì)量好，純度和濃度較高。那么離心柱法提取DNA的實(shí)驗(yàn)步驟與注意事項(xiàng)有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、實(shí)驗(yàn)步驟1.平衡液預(yù)處理取一個(gè)新的吸附柱放在收集管中，懸空加入100μL的平衡液至離心柱中，12000rpm離心1min，倒掉收集管中的廢液，將離心柱放回收集管中，備用。2.處理材料（1）如提取材料為血液，...
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如何制備蛋白質(zhì)電泳凝膠？
2023-10-12
你知道該如何制備蛋白質(zhì)電泳凝膠嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、制備方法1.根據(jù)垂直電泳槽說(shuō)明書(shū)安裝玻璃板，確定需配制分離膠的濃度和體積，配制所需分離膠；2.迅速將分離膠注入兩玻璃板間隙中，留出灌注積層膠所需空間（梳子的齒長(zhǎng)再加1cm，用滴管小心地在分離膠上覆蓋一層0.1%SDS（當(dāng)丙烯酰胺濃度≤8%時(shí)）或異丁醇或水（當(dāng)丙烯酰胺濃度≥10%時(shí)），覆蓋層可防止氧擴(kuò)散進(jìn)入凝膠而抑制聚合反應(yīng)。將凝膠垂直置于室溫下；3.分離膠聚合wan全后，倒出覆蓋層液體，用去離子水洗滌凝膠頂部數(shù)次以除去...
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