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1640培養(yǎng)基為什么會變色？

2024-02-22 細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基的顏色變化往往對應著細胞狀態(tài)。大多數(shù)情況下，1640培養(yǎng)基都呈紅色，這是因為細胞培養(yǎng)基的PH值大多在7.4左右，添加了酚紅的培養(yǎng)基的顏色就是紅色。那么你知道1640培養(yǎng)基為什么會變色嗎？讓我們一起來看看吧！不同成分培養(yǎng)基的顏色會有差異，例如DMEM會比1640顏色深一點，主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導致。當然還有部分培養(yǎng)基不含有酚紅，呈現(xiàn)的就是無色或者淡黃色。開封了一段時間后的1640培養(yǎng)基，顏色會比正常深很多。主要是因為培養(yǎng)基所用的緩沖體系...

常用的基因沉默技術(shù)有哪些？

2024-02-21 基因沉默主要指基因表達的抑制和沉默現(xiàn)象。在生物體內(nèi)，基因的表達受到嚴格調(diào)控，而基因沉默就是一種重要的基因表達調(diào)控方式。根據(jù)作用方式的不同，基因沉默可分為自然發(fā)生的基因沉默和人為操作的基因沉默。自然發(fā)生的基因沉默可通過多種因素實現(xiàn)，如DNA甲基化、異染色質(zhì)形成、轉(zhuǎn)錄后基因沉默（RNAi）等。而人為操作的基因沉默則可以通過基因敲除、轉(zhuǎn)錄因子抑制、表觀遺傳修飾等方法實現(xiàn)。那么，常用的基因沉默技術(shù)有哪些？一起來學習一下吧！RNA干擾（RNAi）：RNAi技術(shù)利用雙鏈RNA（dsRNA...

培養(yǎng)基中各類添加成分所具有的作用是什么？

2024-02-21 細胞培養(yǎng)基是供給細胞營養(yǎng)、維持細胞生長和增殖的多種營養(yǎng)物質(zhì)的混合物，基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其它一些輔助物質(zhì)。人工合成培養(yǎng)基使用時還需添加一定量的血清使細胞生長和繁殖。培養(yǎng)基中各類添加成分所具有的作用是什么？一起學習下吧！L-谷氨酰胺(L-Glutamine)是細胞培養(yǎng)液體環(huán)境中所必需的一種營養(yǎng)成分，是細胞生長的必須氨基酸，為培養(yǎng)的細胞提供重要的能量來源。脫掉氨基后，...

PVDF膜和NC膜的區(qū)別有哪些？

2024-02-20 WB實驗中常用的轉(zhuǎn)印膜有兩種：PVDF膜和NC膜。那么PVDF膜和NC膜的區(qū)別有哪些？一起來學習一下吧！物理性能：PVDF膜具有較高的拉伸強度和斷裂伸長率，而NC膜的拉伸強度和斷裂伸長率較低。PVDF膜較為柔軟，易于切割和折疊，而NC膜較為脆性，不易加工?；瘜W穩(wěn)定性：PVDF膜具有較好的耐化學性，對酸堿性物質(zhì)和一些溶劑具有較好的穩(wěn)定性，而NC素膜則對酸堿性物質(zhì)和有機溶劑比較敏感。PVDF膜具有較好的耐候性，能夠在室外環(huán)境中長時間保持穩(wěn)定性，而NC素膜在陽光和濕度條件下容易分解...

你了解PVDF膜的使用技巧嗎？

2024-02-20 PVDF超濾膜是一種以聚偏氟乙烯（PVDF）為主要原料制成的超濾膜，具有優(yōu)異的耐化學性、耐高溫性、耐候性和機械強度，普遍應用于水處理、食品飲料、生物醫(yī)藥等領(lǐng)域的分離、濃縮和純化等工藝。那么，你了解PVDF膜的使用技巧嗎？一起來學習一下吧！PVDF膜使用時要用甲醇浸泡？PVDF本質(zhì)是一種疏水性的聚合物，在水溶液中不會浸濕。為了在水性緩沖液使用PVDF膜，首先必須將其浸泡在50%醇溶液中。甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。之后必須用水反復沖洗以去除醇類，經(jīng)預處理的膜現(xiàn)在可以直接...

細胞鋪板不勻的解決方法有哪些？

2024-02-19 細胞接種鋪板作為體外藥理實驗中最基本的技能，是實驗成敗的關(guān)鍵因素。鋪板不勻又是科研實驗中通往成功道路的一大障礙，細胞聚集導致的接觸抑制現(xiàn)象使實驗數(shù)據(jù)的可信度大打折扣。本片文章將會介紹細胞鋪板不勻的解決方法有哪些？一起來跟小編漲知識吧！對于96孔板，每孔通常加入100μL細胞懸液。加樣方式為傾斜槍頭，從孔的左邊靠近底部緩慢加入（加樣過快同樣容易導致細胞聚集）。筆者建議，每加完半拉板子時，把細胞重新混勻，繼續(xù)加樣。加樣結(jié)束后，鏡下觀察如有局部不均勻現(xiàn)象，可以采取敲擊法，具體操作如...

WB實驗中出現(xiàn)不同情況的條帶問題怎么解決呢？

2024-02-19 Westernblot是一個非?；A(chǔ)的實驗，但是著實讓我們頭疼，即使是老手也擋不住WB實驗的千錘百煉，懂得都懂，當WB實驗中出現(xiàn)不同情況的條帶問題怎么解決呢？我們一起來探討一下，希望對正在做WB實驗的小伙伴提供一個避雷參考！情況一：條帶呈笑臉狀1.遷移過快或電泳溫度過高：降低電壓或低溫電泳。2.配膠問題，凝膠不均勻冷卻，中間冷卻不好遷移過快：重新配膠，電泳槽老化換新。情況二：條帶呈皺眉狀配膠問題，可能是裝置不合適特別可能是凝膠和玻璃擋板底部有氣泡或者凝膠兩邊聚合不wan全。情...

流式細胞分選抗體該如何存儲？

2024-02-15 流式細胞分選抗體的選擇和實驗條件的優(yōu)化對于獲得準確而可靠的結(jié)果非常重要?？贵w的結(jié)合親和力、選擇性以及背景信號的影響等因素都需要進行仔細考慮和驗證。流式細胞分選抗體的方法：1.根據(jù)實驗需要，選擇合適的流式細胞儀和抗體。抗體可以是標記有熒光染料、生物素-鏈霉親和素體系等等。2.準備待測細胞懸液，確保細胞濃度適宜，并進行單細胞懸浮。3.將細胞懸液與適當稀釋的抗體共孵育，在適當?shù)臅r間內(nèi)進行反應，通常為30分鐘至1小時。4.洗滌細胞，以去除未結(jié)合的抗體。5.使用流式細胞儀進行細胞分選，...