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DMEM培養(yǎng)基選高糖還是低糖?
2023-12-05
DMEM培養(yǎng)基是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞優(yōu)先選擇的一款培養(yǎng)基。根據(jù)葡萄糖含量的高低,DMEM培養(yǎng)基一般可以區(qū)分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)兩種。那么DMEM培養(yǎng)基是選高糖還是低糖呢?讓我們一起來看看吧!一、DMEM高糖培養(yǎng)基:DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來,高糖型DMEM培養(yǎng)基有利于細(xì)胞停泊于一個位置生長,適于生長較快、附著較困難的腫瘤細(xì)胞等。目前已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞。可用于多...
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DMEM培養(yǎng)基的配置方法是什么?
2023-12-05
DMEM培養(yǎng)基是一種富含營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基,可以提供細(xì)胞生長所需的能量、氨基酸和其他重要成分。它可以用于多種細(xì)胞類型的培養(yǎng),包括哺乳動物細(xì)胞、鳥類細(xì)胞和昆蟲細(xì)胞等。DMEM培養(yǎng)基還具有良好的穩(wěn)定性和可調(diào)節(jié)性,可以根據(jù)不同細(xì)胞的需求進(jìn)行改良和優(yōu)化。那么你知道DMEM培養(yǎng)基的配置方法是什么嗎?讓我們一起來看看吧!DMEM培養(yǎng)基的配制方法如下:1.準(zhǔn)備所需材料:DMEM培養(yǎng)基粉末、去離子水、胎牛血清(FBS)、L-谷氨酰胺、雙抗。2.取一定量的去離子水倒入一個無菌容器中,加熱至60℃...
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DNA提取的注意事項(xiàng)
2023-12-05
DNA的提取可以簡單的分為裂解和純化兩大步驟,裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu),從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程,純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分,如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)分離的過程。那么你知道DNA提取的注意事項(xiàng)有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!1.裂解液要預(yù)熱,以抑制DNase,加速蛋白變性,促進(jìn)DNA溶解。2.酚一定要堿平衡,使用平衡飽和酚。苯酚具有高度腐蝕性,飛濺到皮膚、粘膜和眼睛會造成損傷,因此應(yīng)注意防護(hù)。氯仿易燃、易爆、易揮發(fā),具有神經(jīng)毒作用,操作時應(yīng)注意防護(hù)。3...
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抗體特異性驗(yàn)證方法有什么?
2023-12-04
抗體特異性驗(yàn)證方法有什么?抗體特異性從始至終備受重視,那么你知道抗體特異性驗(yàn)證方法有什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、RNA干擾(RNAInterference)RNA干擾是與靶基因序列同源的雙鏈RNA(dsRNA)所誘導(dǎo)的一種特異性基因沉默,可以迅速阻斷基因活性。siRNA(SmallInterferingRNA)是一種小RNA分子(大約21-25核苷酸),siRNA只降解與其序列互補(bǔ)配對的mRNA,其調(diào)控的機(jī)制是通過互補(bǔ)配對來降低相應(yīng)靶位基因的表達(dá),所以是一種典型的負(fù)調(diào)控機(jī)...
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如何選擇熒光定量PCR耗材
2023-12-04
熒光定量PCR檢測技術(shù)已成為當(dāng)前病毒核酸檢測的主要手段,除了高質(zhì)量的檢測試劑、參數(shù)穩(wěn)定的熒光定量PCR儀外,所選用的檢測耗材的質(zhì)量,也會對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性及靈敏度產(chǎn)生很大的影響。那么如何選擇熒光定量PCR耗材呢?讓我們一起來看看吧!一、高純度1.高品質(zhì)、高純度、高透明聚丙烯PP。2.潔凈空間生產(chǎn)加工。二、高熱傳遞性1.極薄的壁厚優(yōu)化熱傳遞減少循環(huán)時間。三、高反射熒光信號1.qPCR更推薦使用優(yōu)質(zhì)的白色PCR耗材。2.管蓋:高透光性,蓋子的光通過率直接關(guān)系著儀器的信號采集,選擇...
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如何分辨細(xì)胞污染類型?
2023-11-30
細(xì)胞培養(yǎng)物污染往往是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中最常見的問題,有時會造成非常嚴(yán)重的后果。細(xì)胞培養(yǎng)污染物可分為兩大類,一類是化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì),包括內(nèi)毒素、增塑劑和洗滌劑,另一類是生物污染物,如細(xì)菌、霉菌、酵母、病毒和支原體,以及其他細(xì)胞系的交叉污染。那么我們該如何分辨各種細(xì)胞污染呢?讓我們一起來看看吧!一、細(xì)菌污染肉眼觀察特點(diǎn):細(xì)菌污染時細(xì)胞培養(yǎng)基可能在幾個小時呈現(xiàn)混濁,爆發(fā)很快。有時稍加震蕩,便會有很多混濁物漂起。在低倍顯微鏡下,細(xì)菌以細(xì)小顆粒的形式出現(xiàn)在細(xì)胞之間,...
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蛋白質(zhì)純化的原理是什么?
2023-11-30
蛋白純化是指通過基因工程技術(shù)將編碼蛋白的核酸序列導(dǎo)入到宿主細(xì)胞,使其大量表達(dá),再使用適當(dāng)?shù)募兓椒▽⑵湓隗w外純化出來,從而獲得高純度、活性和產(chǎn)量的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)可以分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類。那么你知道蛋白質(zhì)純化的原理是什么嗎?讓我們一起來看看吧!一、乳糖操縱子的負(fù)調(diào)控在沒有乳糖存在時,lac操縱子處于阻遏狀態(tài),此時,I序列表達(dá)Lac阻遏蛋白與O序列結(jié)合,阻礙RNA聚合酶與P序列結(jié)合,抑制轉(zhuǎn)錄啟動。當(dāng)有乳糖存在時,乳糖進(jìn)入細(xì)胞,經(jīng)β-半乳糖苷酶催化,轉(zhuǎn)變?yōu)楫?..
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瓊脂糖凝膠電泳的常見問題有哪些?
2023-11-29
瓊脂糖凝膠電泳是根據(jù)核酸(DNA或RNA)分子大小來分離和識別物質(zhì)的技術(shù)。那么你知道瓊脂糖凝膠電泳的常見問題有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!一、同樣大小的DNA一起跑電泳條帶不一樣大DNA條帶不一樣大,本質(zhì)上是DNA在凝膠中的遷移率不一樣,有的跑得快,有的慢,通常情況同樣大小的DNA,遷移率是一樣的,條帶位置也會一樣。但遷移率也受很多因素影響,例如DNA的構(gòu)象。例如環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA,和同等大小的線性DNA(例如單位點(diǎn)酶切后的質(zhì)粒),前者的遷移率要高,表現(xiàn)出來就是看上去超螺...